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光度計采用了怎樣的工作原理及使用方法步驟

更新時間:2022-02-17    點擊次數(shù):1672
   光度計采用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長的光源,光線透過測試的樣品后,部分光線被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
 
  光度計由于分子中的某些基團吸收了紫外可見輻射光后,發(fā)生了電子能級躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。由于各種物質具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構,其吸收光能量的情況也就不會相同,因此,每種物質就有其*的、固定的吸收光譜曲線,根據(jù)這一特性,可對物質進行定性分析。由于物質濃度的不同,吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度也不相同,從而通過對物質吸光度或透過率的測量判定該物質的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎。
 

光度計

 

  光度計使用的方法與步驟:
 ?。?)預熱儀器:
  為使測定穩(wěn)定,將電源開關打開,使儀器預熱20min,為了防止光電管疲勞,不要連續(xù)光照。預熱儀器時和在不測定時應將比色皿暗箱蓋打開,使光路切斷。
 
  (2)選定波長:
  根據(jù)實驗要求,轉動波長調節(jié)器,使指針指示所需要的單色光波長。
 
  (3)固定靈敏度檔:
  根據(jù)有色溶液對光的吸收情況,為使吸光度讀數(shù)為0.2~0.7,選擇合適的靈敏度。為此,旋動靈敏度檔,使其固定于某一檔,在實驗過程中不再變動。一般測量固定在“1”檔。
 
 ?。?)調節(jié)“0”點:
  輕輕旋動調“0”電位器,使讀數(shù)表頭指針恰好位于透光度為“0”處(此時,比色皿暗箱蓋是打開的,光路被切斷,光電管不受光照)。
 
 ?。?)調節(jié)T=100:
  將盛蒸餾水(或空白溶液或純溶劑)的比色皿放入比色皿座架中的第一格內,有色溶液放在其它格內,把比色皿暗箱蓋子輕輕蓋上,轉動光量調節(jié)器,使透光度T=100,即,表頭指針恰好指在T=100處。
 
 ?。?)測定:
  輕輕拉動比色皿座架拉桿,使有色溶液進入光路,此時表頭指針所示為該有色溶液的吸光度A,讀數(shù)后,打開比色皿暗箱蓋。
 
 ?。?)關機:
  實驗完畢,切斷電源,將比色皿取出洗凈,并將比色皿座架及暗箱用軟紙擦凈。

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